微小RNA-16在肝细胞肝癌生长侵袭中的作用

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-16在肝细胞肝癌生长侵袭中的作用。方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测不同肝癌细胞株及人正常肝细胞(购自中国科学院上海细胞库)中miR-16表达,应用Lipofectamine?3000将miR-16 mimics、miR-16 NC转染到肝癌细胞,分别记为miR-16 mimics组和miR-16 NC组,并测定miR-16表达量,细胞活力、细胞凋亡、细胞周期、细胞侵袭能力及B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、髓细胞白血病-1(Mcl-1)、细胞周期素D1(CCND1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Wnt3a及β-连环蛋白(β-catenin)表达。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用t检验。结果 SMMC-7721(0.65±0.03),HepG2(0.44±0.04),Bel-7402(0.28±0.03),Huh 7(0.87±0.06)和MHCC97(0.23±0.02)肝癌细胞中miR-16表达量显著低于L02正常肝细胞(2.16±0.22)(t＝11.291,P<0.05),差异有统计学意义。miR-16 mimics组(2.03±0.20)miR-16表达量较miR-16 NC组(0.54±0.05)提高(t＝7.311,P<0.01)。miR-16 mimics组(0.36±0.04)细胞活力较miR-16 NC组(0.59±0.06)降低(t＝9.436,P<0.05),差异有统计学意义。miR-16 mimics组细胞早期凋亡率(18.54±1.85)%及晚期凋亡率(20.37±2.03)%较miR-16 NC组[(2.35±0.20)%,(3.24±0.32)%]提高(t＝6.624,P<0.05),差异有统计学意义,miR-16 mimics组细胞周期G1期(64.17±6.42)%较miR-16 NC组(48.45±4.85)%延长(t＝7.612,P<0.05),差异有统计学意义。miR-16 mimics组(42.53±1.36)细胞侵袭能力较miR-16 NC组(134.54±13.45)降低(t＝7.311,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果表明miR-16 mimics组中bcl-2、Mcl-1、CCND1、MMP-2、MMP-9、Wnt3a及β-catenin表达量较miR-16 NC组下调(t＝9.154,P<0.05),差异有统计学意义。结论 miR-16过表达可能通过阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制HepG2肝癌细胞的生长与侵袭。

【关键词】 癌 肝细胞 微小RNA-16 生长 侵袭

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